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手把手教你构好稳转细胞株❗(超详细教程)

构建稳转株之前也发过几篇笔记了,今天从质粒构建→包病毒→感染目的细胞→筛选阳性细胞都详细讲讲,顺便把之前大家的问题回答一下😊

质粒构建:这一步是最关键的一步,质粒构建正确才能保证基因过表达或敲低成功,自己构质粒比较麻烦,我一般交给公司去构,硅基生物在构质粒这一块还是很有优势的,目前构的质粒都很好,而且最近有活动,一个bp才0.35[哇R]首次订还能0.9哲;推荐朋友还能获得一些小福利
包病毒及感染目的细胞的详细步骤如图4及图6~

🌿下面回答一些之前大家问的比较多的问题
1.病毒液需不需要浓缩,浓缩后需不需要测滴度?
👉🏻个人经验来看的话浓缩之后的病毒液感染效率更高,这样可以缩短稳转株构建时间;病毒液理论上是需要测滴度的,但是我一般不测,测出来也不一定准确,我一般按图5来使用
2.加完病毒液之后细胞背景脏脏的怎么办?
👉🏻这个情况我也有出现,病毒液刚加进去的前面两天细胞状态一般,但是后面养几天就好了,这个问题不用担心~

还有其他问题可以一起交流😊