从大家给我的s信里看到很多人和我要质粒构建的ppt,自己做的ppt哦,[得意R]都分享给大家了,也有不少人问我载体上都有什么元件,分别代表什么,今天整合了部分我手里有的载体的信息,分享给大家。
✍️之后还有一个重要角色着重分享,想单独出一篇,是四环素诱导型载体,最近在做这个细胞模型,感觉挺有意思,而且估计不少人会用到,包括:载体解读,如何使用如何构建稳定细胞系,如何用四环素诱导表达等重要信息。‼️
此笔记包括:
✨mCherry融合目的基因的瞬时表达载体(红光)
✨GFP不融合目的基因的稳定表达载体(绿光)
✨不带荧光的Cas9-v2载体(不带光,基因敲除)
很多载体的元件其实都是有共性的,基本所有载体都需要,比如复制起点,多克隆位点(MCS)等。
所有的标签蛋白可以与目的蛋白融合,也可不融合,看自己需要。此笔记所涉及的载体中的荧光标签蛋白都是可有可无的,看自己需要买合适的。
💅个人建议:
1.目的蛋白比较小,不要带荧光标签。
目的蛋白比较大,带荧光标签(融合)。
2. Flag,Myc,HA等小标签可以带,带到目的蛋白的N端或者C端,融合。
之前分享过质粒如何构建(野生型质粒,敲低质粒protocol 都分享过),有想要相关资料的可以s博主,📪发给大家。







